冻干菌毒种的恢复培养方法
凡从CVCC所购冻干菌种,,建议在无菌条件下采用下列方法进行恢复培养。
方法一
1. 用三棱钢锉在封口下2cm处横锉安瓿;
2. 用浸过75%酒精的脱脂棉团擦净安瓿表面;
3. 用纱布块或脱脂棉团包裹安瓿,在锉痕处折断安瓿。注意:纱布块或脱脂棉团不能太湿,以防止安瓿折断后,酒精进入安瓿内;
4. 开启安瓿后,用无菌吸管加入0.3ml~0.5ml的液体培养基于安瓿管内,使冻干菌种溶解呈悬浮液;
5. 混匀后,将悬浮液移植于液体培养基中或固体培养基上,在适宜温度等条件下培养。
方法二
1. 用浸过75%酒精的脱脂棉团擦净安瓿表面;
2. 待安瓿表面酒精挥发后,将安瓿的封口端移至酒精灯火焰上加热;
3. 用无菌水滴至安瓿顶端使玻璃破裂;
4. 用无菌镊子敲开安瓿顶端;
5. 用无菌吸管加入0.3ml~0.5ml的液体培养基于安瓿管内,使冻干菌种溶解呈悬浮液;
6. 混匀后,将悬浮液移植于液体培养基中或固体培养基上,在适宜温度等条件下培养。 |